Помимо обследования до начала терапии, анализ на ПЦР РНК ВГС необходим для суждения об исходах лечения.
ПЦР анализ: что это такое?
Для диагностики папилломавирусной инфекции необходимо сдать анализ на ДНК папилломавируса методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) или гибридизации. Иностранные граждане обязаны предъявить отрицательный результат ПЦР-тестирования, проведённого не ранее чем за два дня до прибытия на территорию Российской Федерации. Для диагностики папилломавирусной инфекции необходимо сдать анализ на ДНК папилломавируса методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) или гибридизации. Анализ крови на ПЦР – лабораторный анализ, помогающий выявить наличие бактериальных и вирусных возбудителей.
Суть анализа ПЦР на гепатит В и его результаты
Когда разрушенные участки генетического материала уже погибшего возбудителя еще сохраняются в крови или биологических средах. Результат становится отрицательным по истечении шести-девяти месяцев после терапии. Какой врач проводит расшифровку ПЦР-исследований Первично назначается анализ либо венерологом, либо урологом, либо гинекологом для женщин. Оценка анализа и выставление результатов в бланке ответа — это функция врача-лаборанта, проводившего исследование. Дальнейшая интерпретация полученных данных — это функционал узкого специалиста, к которому обращается пациент. Врач назначает такие исследования обычно при: признаках острого воспаления урогенитального тракта, для уточнения причины воспаления, перед планируемой беременностью или эко, у беременных с отягощенной акушерской историей, для контроля эффекта от проводимого лечения по поводу вензаболевания не раньше, чем спустя месяц после окончания терапии , в качестве скрининга для исключения бессимптомного течения инфекции при наличии более одного партнера за год. Методы молекулярной биологии имеют важное от культуральных или серологических методик отличие. Они не требуют определенного накопления возбудителя или антител к нему и чувствительны практически сразу от момента заражения. Нет смысла выдерживать паузу в течение предполагаемого инкубационного периода венерической инфекции.
Анализ можно сдавать сразу после того, как возникли подозрения о возможном заражении или развитии инфекционного агента.
Адреса и телефоны клиник и лабораторий — по этой ссылке. ИФА или иммуноферментный анализ — это определение наличия в крови пациента антител к инфекционным агентам. Иными словами, тест ИФА позволяет понять, были ли вы инфицированы вирусом COVID-19, болеете ли вы в данный момент например, если болезнь протекает бессимптомно и есть ли у вас иммунитет к вирусу. Как объяснила корреспонденту Ykt. IgM — это самые ранние антитела, которые появляются при первой иммунной реакции организма на внедрение вируса и указывают на то, что заболевание протекает на данный момент. IgG-антитела вырабатываются позже и остаются в организме надолго. Это говорит о формирующемся или сформированном иммунитете. Как «прочитать» результаты тестирования.
Смотрите инфографику или, если не хотите вникать в эти цифры, прочитайте статью на эту тему на Ykt. Как проводится ИФА-анализ. Для теста ИФА берут кровь из вены. До анализа нельзя принимать пищу минимум в течение четырех часов и употреблять алкоголь 24 часа.
Они не требуют определенного накопления возбудителя или антител к нему и чувствительны практически сразу от момента заражения. Нет смысла выдерживать паузу в течение предполагаемого инкубационного периода венерической инфекции. Анализ можно сдавать сразу после того, как возникли подозрения о возможном заражении или развитии инфекционного агента. ПЦР: результат отрицательный Отсутствие возможности даже ускоренного ферментами удвоения фрагментов генетического материала говорит об отрицательном результате исследования. Чаще всего при отрицательном результате речь идет о том, что специфические для искомого возбудителя ДНК или РНК не обнаружены.
Или концентрация генетического материала ниже пороговой чувствительности теста. Как выглядит бланк результатов ПЦР анализов? Первый вариант говорит о наличии инфекционного процесса, вызванного искомым возбудителем. Второй — об отсутствии генетического материала инфекционного агента или его количестве ниже порога чувствительности. Расшифровка результатов ПЦР исследований проводится в тот же день, когда получены результаты или в момент обращения к врачу.
Мы на практике в универе почему-то делали так же... Но как только мир понял, что ПЦР - это офигенно, сразу появились лабораторные приборы, которые этот процесс автоматизируют. Фактически это просто нагревательный блок, способный очень точно держать температуру в течение заданного времени и быстро его менять. Сейчас их на рынке пруд пруди, на любой вкус и цвет, чуть ли не кофе умеют готовить. Но как нам это все помогает при анализах на вирус? Вот такой милаха прогонит ПЦР за полчасика Медицинское применение. Причем ее может быть изначально очень мало, но цепной характер реакции позволит нам ее приумножить. Но если изначально целевой ДНК в пробе нет, то и реакция не пройдет. Добавляем полимеразу и праймеры, которые сядут именно и только на определенное место в ДНК какого-то интересующего нас патогена ДНК патогена ведь сильно отличается от нашей. Запускаем реакцию и смотрим, прошла она или нет! Если прошла - значит, пациент был заражен этим патогеном, а на нет и суда нет. Получился очень точный, быстрый и относительно дешевый метод выявления патогенов - прикиньте, раньше пока анализ на какую-нибудь бактерию высеешь на питательную среду, дождешься, чтобы оно подросло, определишь, что выросло - несколько дней пройдет. А тут готовый результат за пару часов! Осталось только подобрать такие праймеры, чтобы они садились "отжигались" действительно только на ДНК патогена, а не на человеческую ДНК. Этот трудоемкий процесс и называется созданием тест-системы - наверняка слышали такое словосочетание в новостях! Этим занимаются, как правило, крупные компании, вкладывающие в этот процесс большие деньги и время. Но тут что хорошо - один раз подобрал такие праймеры - и все, дальше любой лаборант с минимальным опытом сможет провести сам анализ. Дальнейшее развитие ПЦР пошло по пути ответа на вопрос "прошла реакция или нет? Логичным ответом на него стала ПЦР в реальном времени англ. Ну что ж, надеюсь, мне удалось приподнять завесу непонятного и слегка просветить любопытных!
Цепная реакция. Как работают тесты на коронавирус?
IgG вырабатываются позже, примерно с 21-28 дня от момента заражения, и сохраняются в организме более продолжительное время, в течение нескольких месяцев или лет. Следовательно, обнаружить их удастся только на стадии выздоровления или в более поздние сроки. По наличию и уровню IgG в крови можно судить, как о факте перенесенной инфекции в прошлом, так и определить наличие специфического иммунитета к данному возбудителю. Какой способ диагностики лучше? Учитывая, чем отличается ПЦР от антител на КОВИД, разницу в данных исследованиях, нельзя однозначно определить, какой способ диагностики является предпочтительным. При наличии контакта с заболевшим человеком или инфицированным, а также в случае наличия симптомов, укладывающихся в картину коронавируса, рекомендуется ПЦР-диагностика в клинике в Перово. Она занимает больше времени, но позволит получить достаточно достоверные данные о наличии инфекционного возбудителя в организме. Анализ окажется информативным, если заболевание проходило даже в бессимптомной форме.
А я, как человек, имеющий к ПЦР непосредственное отношение, попробую объяснить максимально простым языком. Итак, ПЦР - полимеразная цепная реакция. Чтобы объяснить, что там делает полимераза и что это вообще , откуда цепь, и что вообще происходит, сначала надо вспомнить азы молекулярной биологии. ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота. Это длинная реально длинная! Пара метров!! В вирусах, кстати, тоже, хоть они и не имеют клеточного строения. На этой молекуле аки на дискете закодированы все белки, которые клетка способна производить, а также еще много чего, регулирующего работу клетки. Но если компы используют двоичный код, представляя информацию в виде кучи 0 и 1, то в ДНК информация закодирована последовательностью 4 букв - нуклеотидов. Эти 4 буквы - A, T, G и С - обозначают химические вещества аденин, гуанин, цитозин и тимин. Эти вещества тупо стоят длинной цепочкой, крепко сшитые химическими связями. Прикол в том, что ДНК состоит из двух таких цепочек, причем вторая является зеркальной копией первой это называется умным термином "обратная комплементарность". Как так вышло? Дело в том, что помимо сильных связей с соседями по цепи, нуклеотиды умеют образовывать еще и относительно слабые водородные связи, причем А и Т всегда будут иметь две связи, а G и С - три. Таким образом, напротив А в одной цепи всегда будет стоять Т в другой, и та же фигня с G и С. Легко понять, что такие цепи, по сути, несут одну и ту же информацию. А так как двойная спираль ДНК значительно более устойчива к воздействию извне, то в ходе эволюции на заре истории Земли цепи решили подружиться и жить вместе. Тем более, что такая дружба дала им одно очень важное преимущество. Репликация ДНК. Рано или поздно клетке надо будет поделиться, обеспечив рост организма или размножение.
При обследовании на инфекции, передающиеся половым путем ИППП , у мужчин и женщин забираются выделения из половых органов, мазок или соскоб из шейки матки, мазок или соскоб из уретры мочеиспускательного канала , моча. Нередко для обследования на поражение нервной системы при ряде исследований забирается спинномозговая жидкость. В пульмонологии материалом служит мокрота, плевральная жидкость. При обследовании на внутриутробные инфекции — околоплодные воды, ткани плаценты. Подготовка к сдаче материала и проведению ПЦР-диагностики Практически все пациенты, которым проводится ПЦР-диагностика, вправе рассчитывать на достоверный, точный и быстрый результат, зависящий в большой степени от возможности лаборатории, профессионализма врача-лаборанта. Вместе с тем, многие не задумываются, что эта самая достоверность во многом зависит и от нас самих, а именно от рекомендаций лечащего доктора, образа жизни и правильности забора материала. При заборе материала требуются условия, исключающие контаминацию загрязнение материала и, соответственно, ставящие под сомнение объективность анализа. Правильная подготовка к сдаче материала не представляет особых сложностей. Существуют следующие рекомендации врачей для пациентов: 1 не жить половой жизнью за сутки до сдачи материала; 2 кровь для исследования сдается утром натощак не есть, не пить ; 3 при сдаче мочи собирается первая утренняя порция в чистый стерильный контейнер. Сроки готовности ПЦР-анализа Окончательный результат готов через 1,5-2х суток после сдачи материала. В некоторых случаях результат готов в первый же день. Расшифровка результатов ПЦР Отрицательный результат ПЦР указывает на то, что в исследуемом материале на момент его сдачи не обнаружено никаких следов инфекционных агентов. Большинство случаев показывает отсутствие инфекции, которую пытались найти в исследуемой пробе.
Биоптаты, то есть материалы, полученные путем биопсии. Обычно на анализ отправляют биоптаты двенадцатиперстной кишки или желудка, чтобы выявить хеликобактерную инфекцию. Объем материала 2—3 мм3. Хранение и транспортировка биоматериала. Хранить образцы можно при комнатной температуре не более 2 часов. Оттаивание и повторное замораживание проб запрещено. Транспортировка, если она необходима, должна проводиться в специальных термоконтейнерах или термосах с соблюдением всех правил хранения и перевозки биоматериалов. Выделение ДНК из образца. Способ выделения зависит от вида определяемого микроорганизма и от вида биологического образца. Если, например, анализируется соскоб эпителиальных клеток, используется так называемый метод твердофазной сорбции, заключающийся в добавлении в образец специального вещества, концентрации ДНК на сорбенте и его многократной отмывке буферным раствором. Проведение ПЦР. Некоторое количество образца из биологической пробы переносится в специальную микроцентрифужную пробирку. Туда же добавляется амплификационная смесь, имеющая сложный состав, в объеме 25 мл. Пробирки устанавливают в программируемый термостат, и автоматическом режиме проводится амплификация. Время ее проведения зависит от заданной программы и составляет 2—3 часа. Одновременно с опытными пробами проводятся контрольные — положительные, включающие в себя контрольный препарат ДНК исследуемого возбудителя, и отрицательные, не содержащие исследуемую ДНК. Количество циклов амплификации варьирует от 30 до 40, более 40 циклов проводить не рекомендуется, так как это способствует увеличению количества неспецифических продуктов в пробе. Регистрация результатов. Фрагмент ДНК, характерный для возбудителя инфекции, выделяют методом электрофореза в присутствии специального вещества — бромистого этидия. Его соединение с фрагментами ДНК дает светящиеся полосы при облучении ультрафиолетовым излучением. Образец помещают в камеру для электрофореза и в течение 35—40 минут проводят разделение продуктов амплификации. После этого образец просматривают в ультрафиолетовом свете — наличие оранжевой светящейся полосы свидетельствует о положительном результате. Интерпретация результатов исследования. Результат ПЦР-диагностики может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат говорит о том, что в организме человека обнаружены следы инфекции, причем именно в данный момент времени. Количественный результат ПЦР-анализа оценить может только врач, они индивидуальны для разных типов инфекций. На основании количественного результата можно сделать вывод о степени активности заболевания и определить характер лечения.
ПЦР анализ: что это такое? На какие 12 инфекций сдается?
Виды теста методом полимеразной цепной реакции: качественная, количественная и генотипирование. Как правильно сдавать анализ и расшифровка отрицательного результата ПЦР при положительных показателях ИФА. Как расшифровать качественный тест на антитела к коронавирусу. Отрицательный ПЦР ("не обнаружено ") тест мазка на короновирус говорит, чтобы вы не выделяйте вирус в окружающую среду и не заразны для окружающих. Если ПЦР, экспресс-тест и IgM-антитела отрицательные, это скорее всего значит, что в последние 2-3 недели коронавируса у вас не было.
Контроль взятия материала (КВМ) - что это такое?
Анализ методом ПЦР позволяет обнаружить возбудителя заболевания, присутствующего в организме даже в минимальных количествах. Такая возможность существует при ПЦР-тесте, когда биоматериал получают с помощью соскоба эпителиальных клеток из ротоглотки. Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, используется для диагностики язвы желудка, колита, энтерита.
Анализ ПЦР 12 инфекций
Максимальной концентрации он достигает к концу инкубационного периода примерно за 14 дней до его завершения. В крови HBsAg сохраняется на протяжении 1-6 месяцев. Затем численность патогена начинает сокращаться, и через 3 месяца его количество приравнивается к нулю. Когда при профилактическом обследовании у здорового пациента обнаруживают антиген HBsAg, сразу не делают вывод о том, что он инфицирован. Сначала подтверждают анализ, проведя другие исследования на присутствие опасной инфекции. Людей, у которых антиген обнаружен в крови спустя 3 месяца, относят к группе вирусоносителей. Часть из них будет заразна до конца жизни. Медики предполагают, что австралийский антиген, пребывая в организме продолжительное время, провоцирует возникновение раковых опухолей. Если при исследовании крови получают положительный результат, это означает, что человек инфицирован. Суммарные антитела к поверхностному антигену вируса находят у пациента при начавшемся выздоровлении. Происходит это после удаления HBsAg, обычно по прошествии 3-4 месяцев.
Anti-HBs защищают человека от гепатита B. Они прикрепляются к вирусу, не позволяя ему разноситься по организму. Благодаря им иммунные клетки быстро вычисляют и убивают патогенных микроорганизмов, не дают прогрессировать инфекции. Суммарная концентрация, появляющаяся после инфицирования, используется для выявления иммунитета после прививки. Нормальные показатели говорят о том, что целесообразно проводить повторную вакцинацию человека. Со временем суммарная концентрация маркеров этого вида понижается. Впрочем, встречаются здоровые люди, у которых антитела к вирусу существуют пожизненно. Возникновение Anti-HBs у больного когда количество антигена устремляется к нулю считают положительной динамикой заболевания. Пациент начинает выздоравливать, у него появляется постинфекционный иммунитет к гепатиту. Ситуация, когда при остром течении инфекции обнаружены маркеры и антигены, свидетельствует о неблагоприятном развитии болезни.
В этом случае патология прогрессирует и усугубляется. Когда делают тесты на Anti-HBs Определение антител проводят: при контролировании хронического гепатита В тесты делают 1 раз в 6 месяцев ; у людей, причисленных к группе риска; перед прививкой; Нормальным считается отрицательный результат. Положительным он бывает: при наметившемся выздоровлении пациента; если возникла вероятность инфицирования другим типом гепатита. Вирусный гепатит С содержит рибонуклеиновую кислоту, а частое наличие ложно положительных результатов при проведении анти-HCV-анализа крови делает его идеальным кандидатом для проведения данного исследования. Это хорошая идея обсудить ваши проблемы с медицинским работником или консультантом, который обучен, чтобы помочь вам справиться с гепатитом и другими. Если это произойдет, стоит поговорить с вашим врачом, поскольку многие консультанты готовы писать в ипотечную или страховую компанию с указанием вашего здоровья и ожидаемой продолжительности жизни. Кто должен сказать: это часто бывает трудным решением, но считайте, что положительный результат может повлиять на вашу семью и сексуального партнера, и должны ли эти люди также думать о тестировании. Соответствующий раздаточный материал для пациентов, написанный авторами этой статьи. Выделяют проведение качественного и количественного вида диагностики, из которых наиболее показательным является второй. Отрицательной стороной этого диагностического инструмента является его дороговизна, а так же длительность проведения исследования, в связи с чем HCV анализ крови является наиболее доступным, а при правильном его выполнении, количество ошибок является минимальным.
Особенности течения заболевания Это первая из двух частей статьи о гепатите С. Гепатит С, вызванный вирусом гепатита С, является серьезной проблемой общественного здравоохранения в Соединенных Штатах. Все генотипы являются патогенными, и, по-видимому, нет никакой корреляции между генотипом и источником инфекции. Почему большинство пациентов постоянно заражаются? Однако последовательные изменения в вирусном геноме приводят к вариантам, которые не распознаются существующими ранее антителами, которые обычно нейтрализуют или предотвращают инфекцию. Порождение этих белков-мутантов нейтрализации, по-видимому, является механизмом, с помощью которого вирус устанавливает и поддерживает постоянную инфекцию. Отсутствие эффективного ответа нейтрализующего антитела также означает, что естественная инфекция не защищает от реинфекции одинаковыми или разными генотипами вируса. Клинические особенности и естественная история По той же причине нет эффективной профилактики до или после постконтактной терапии. Только 15 процентов пациентов требуют госпитализации, а молниеносная болезнь встречается редко. Этот аспект гепатита С требует длительных последующих мер для обеспечения надлежащего диагноза и управления.
Прогресс хронического заболевания печени обычно коварный: он медленный и без симптомов или физических признаков у большинства пациентов в течение первых двух десятилетий после заражения. Часто хронический гепатит не распознается до появления симптомов развития прогрессирующей болезни печени. ВГС анализ крови является лабораторным методом диагностики гепатита С, механизм его действия построен на идентификации антител типа Ig G и Ig M, которые начинают активно вырабатываться при появлении в крови антител вируса. Это патогенные микроорганизмы, появляющиеся спустя несколько недель или даже месяцев с момента инфицирования человека. Период обнаружения антител в крови и методы их определения Антитела к компонентам вируса гепатита С появляются не одновременно, что, с одной стороны, представляет некоторые трудности, но с другой позволяет с большой точностью определить стадию заболевания, оценить риск развития осложнений и назначить наиболее эффективное лечение. Сроки появления антител примерно следующие: Анти-HCV сумм. Anti-NS3 — на ранних этапах сероконверсии. Для выявления антител в лабораториях применяется метод иммуноферментного анализа ИФА.
Понятно, что теперь определить, какой возбудитель у данной конкретной инфекции, достаточно легко. Достоинства Теория — это, безусловно, замечательно, но что мы имеем на выходе? Какую практическую выгоду получает человек, когда отправляется на поиски вредоносных микроорганизмов, вооруженный ПЦР? Безусловно, одно из главных достоинств — это универсальность метода. Оборудование, используемое для ПЦР, стандартно, оно не зависит от того, что именно и где именно мы ищем. Следующий плюс — высокая специфичность. В материале, направленном на исследование, определяется уникальная последовательность нуклеотидов, характерная только для конкретного возбудителя. Кроме того, это позволяет одновременно, в одном и том же материале, проводить поиск нескольких возбудителей без какого-либо ущерба для качества ответа. Метод обладает высочайшей чувствительностью — мы уже говорили о том, что возможно найти всего один фрагмент генетического материала возбудителя. Несомненное преимущество метода — оперативность. Постановка реакции занимает несколько часов, таким образом, вся диагностика, от момента сдачи материала на анализ до получения результата, отнимет всего один день. При помощи ПЦР определяют возбудителя , а не реакцию на его внедрение со стороны организма. Таким образом, появилась возможность точно диагностировать заболевание еще в инкубационном периоде, когда нет никаких клинических или лабораторных признаков болезни. Но они напрямую связаны с его достоинствами и с так называемым «человеческим фактором». ПЦР — очень высокотехнологичный метод, требующий соблюдения строжайших правил оснащения лаборатории. Это связано с тем, что в воздухе постоянно присутствует невероятный коктейль из фрагментов ДНК всевозможных живых организмов, и в процессе подготовки к проведению реакции образец может быть загрязнен — возможно «ложное срабатывание».
Биологический материал для мужчин и женщин — кровь или мазок. Для выявления микоплазмы целесообразнее брать мочу или соскоб. Но нужно учитывать, что точность уретрального или влагалищного мазка превосходит исследование мочи. Востребованным является ПЦР 6, в который входит хламидиоз , уреаплазмоз , микоплазмоз ДНК mycoplasma genitalium и mycoplasma hominis , гарднереллез , трихомониаз. Показания Анализ ПЦР на ЗППП назначают для дифференциальной диагностики при появлении следующих симптомов: боль внизу живота, в том числе во время полового акта; специфические выделения из влагалища: желтые, серые, зеленые, гнойные, пенистые, водянистые, с неприятным запахом и т. ИППП могут протекать бессимптомно, особенно у мужчин. Но даже при бессимптомном течении их нужно лечить, поскольку они провоцируют возникновение тяжелых осложнений. Показанием к молекулярной диагностике методом ПЦР в урологии и гинекологии является: воспаление шейки матки, простаты, уретры, органов малого таза; бесплодие у мужчин и женщин; эректильные нарушения. Анализ на скрытые инфекции требуется после незащищенного полового акта с постоянным при наличии симптомов ЗППП или незнакомым партнером, на этапе подготовки к беременности , а также по окончанию лечения половых инфекций. Вирусы, как ВПЧ или генитальный герпес не поддаются лечению. Бактериальные и грибковые инфекции излечимы.
При анализе выделяют фрагмент ДНК, присущий конкретному возбудителю. Уникальность участка позволяет в одном и том же материале находить одновременно нескольких возбудителей без ущерба качеству. Для исследования достаточно несколько молекул ДНК активного или даже уже разрушенного патогена, но который оставил специфические участки. Метод выявляет одну болезнетворную бактерию среди миллиардов других, при этом он эффективен там, где бессильны другие виды исследований — микроскопический, бактериологический, иммуноферментный. Не требуется искусственно выращивать возбудитель. На постановку реакции нужно всего лишь несколько часов, то есть результат можно получить в течение дня. Диагностику заболевания в инкубационном периоде. Анализ определяет возбудителя, а не реакцию организма на него. Выходит, что можно поставить точный диагноз, когда болезнь еще никак себя не проявила. Для анализа подходит большинство разновидностей биоматериала — слизь, моча, кровь, сыворотка, мокрота, эякулят, соскоб эпителиальных клеток, гной, жидкости из абсцессов. Особенности применения ПЦР-теста Метод используют везде, где нужен быстрый, точный и надежный результат. Возбудители многих инфекций имеют несколько штаммов, поэтому точная диагностика гарантирует и эффективность лечения.