Если результат ПЦР отрицательный или нет признаков болезни, повторить тест на антитела через 2-3 недели. Расшифровка ПЦР на гепатит С должна проводиться квалифицированным специалистом. ПЦР-тест позволяет определить наличие вируса папилломы, а также его тип и степень угрозы для здоровья. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) обладает высокой специфичностью при выявлении РНК SARS-CoV-2. Однако в случае с полимеразной цепной реакцией расшифровка результатов ПЦР исследований мало зависит от биологического материала, который брался у пациента.
Результаты ПЦР
Расшифровка ПЦР на гепатит С должна проводиться квалифицированным специалистом. Полимеразная цепная реакция почти для каждого из нас стала обыденностью, даже если этот каждый никогда и слов таких не слышал. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того.
ПЦР анализ: что это такое?
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является мощнейшим инстументом современной молекулярной биологии. Родоначальником метода ПЦР (полимеразной цепной реакции) считается ученый из Норвегии Х. Клеппе. Полимеразную цепную реакцию (ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году Кэри Мюллис (американский учёный). Результаты ПЦР – когда готовы, расшифровка. Опытный венеролог: как быстро получить результаты анализов ПЦР.
Для чего используется
- 12 методов в картинках: полимеразная цепная реакция
- ПЦР-тест и тест на антитела к коронавирусу: как разобраться в результатах?
- ПЦР-15: описание, интерпретация результата, референсные значение
- Что такое ПЦР?
- Диагностика COVID-19: обзор основных методов
- Принцип метода
Что такое ПЦР-анализ?
При втором биологический материал, взятый от больного человека, применяют для засевания специфической среды, которая благоприятна для роста колоний возбудителя. Диагностика и в том, и в другом случае может длиться дни или недели. Обследование ПЦР может проводиться с разными биологическими материалами, которые получают от больного человека. В виде образцов выступают кровь и прочие патологические, физиологические и биологические среды и жидкости. Можно сделать ПЦР кала или мочи.
Методом количественной ПЦР чаще всего диагностируют атипичные и вирусные инфекции, поскольку они могут не поддаваться простой диагностике из-за специфики спровоцированного ими патологического процесса. Для определения таких инфекций нужно время, на протяжении которого в организме начинают вырабатываться антитела, определяемые серологическими методами. Но это неприемлемо в ряде случаев. Способ проведения Способ проведения ПЦР — лабораторное установление инфекции в образцах, изолированных от пациента ин витро.
Чтобы провести полимеразную цепную реакцию, требуется набор особых реактивов. Исследуемый материал вносится в пробирки с реактивами. При любом цикле, если в образцах имеется последовательность РНК или ДНК возбудителя, то в растворе все больше накапливаются копии частиц данных нуклеиновых кислот. Определить можно и присутствие возбудителя, и количество его в образцах.
Качественный анализ методом ПЦР позволяет получить такой результат: отрицательно, когда искомый возбудитель не обнаружен в образцах; положительно, если в образцах найдены последовательности, которые характерны для определенного возбудителя. Например, нарушения техники проведения анализа и правил хранения реактивов могут в значительной степени уменьшить точность исследования. Количественная ПЦР определяет понятие вирусной нагрузки. Можно определить при этом, сколько в образцах, взятых у пациента, было комплектов ДНК возбудителя.
Тяжесть инфекции прямо пропорциональна повышению их количества. Также можно определить успешность терапии по уменьшению вирусной нагрузки. Пациенту во время визита к врачу скажут, что необходимо сдавать: соскоб, мазов, мочу или кровь. ПЦР может определить возбудителей вне зависимости от уровня загрязнения материала.
Для положительного анализа в теории требуется присутствие всего лишь одного возбудителя в образцах. На практике же стараются создать еще более благоприятные условия. Существуют для этого некоторые рекомендации: если сдают соскоб или мазок из половых органов, нужно воздержаться от интимной связи за три дня до исследования; нельзя перед анализом спринцеваться с антибактериальными препаратами или подмываться; за три часа до взятия из уретры мазка нужно потерпеть и не опорожнять кишечник. При сдаче крови пациентом таких правил можно не придерживаться.
Как расшифровываются результаты количественного анализа ПЦР? Такие вопросы особенно актуальны при обследовании людей с хроническими инфекциями вирус человеческого иммунодефицита, гепатиты В и С. При диагностике основываются на том, что накопление ампликонов ПЦР продуктов пропорционально наличию копий искомого гена в анализируемой пробе. Конечно, учет результатов проведения количественной ПЦР делается посредством гель-электрофореза с исследованием интенсивность специальных сигналов ПЦР.
Также обязательным условием верной количественной оценки полученных результатов являются положительные надежные контрольные пробы, содержащие известное количество копий искомого гена к примеру, на одну ПЦР-реакцию тысяча копий гена гепатита С. Несколько последовательных разведений количественного контроля позволяет создать калибровочные кривые, и по ним оценивается содержание в клинических образцах генокопий.
Это особенно важно в ранней диагностике вирусного гепатита у людей, подвергшихся риску заражения, а также при контроле за противовирусной терапией. При лечении альфа-интерфероном отсутствие РНК вируса через 24 недели после завершения терапии служит критерием ее эффективности. Для чего используется исследование? Для раннего выявления вирусного гепатита С. Для дифференциальной диагностики гепатитов. Для контроля за эффективностью противовирусного лечения. Для мониторинга течения вирусного гепатита С. Для проверки донорской крови.
При сомнительных результатах серологического исследования.
Расшифровка результатов ПЦР Отрицательный результат ПЦР указывает на то, что в исследуемом материале на момент его сдачи не обнаружено никаких следов инфекционных агентов. Большинство случаев показывает отсутствие инфекции, которую пытались найти в исследуемой пробе. Положительный результат ПЦР указывает на выявление следов инфекции в исследуемой биологической пробе. С большой точностью положительный результат указывает на наличие инфекции в данный момент времени. Существуют ситуации, когда ПЦР оказывается положительной, а об активной инфекции говорить нельзя — это так называемое «здоровое носительство» без клинических симптомов болезни, которое не требует лечения, но требует динамического наблюдения у врача. Наблюдается чаще при ряде вирусных инфекций ВПЧ, ЦМВИ, ВЭБ-инфекция, герпетическая инфекция и другие в таких материалах как слюна, соскоб цервикального канала, уретры, то есть из местного очага. Однако нельзя забывать, что передача инфекции от носителей здоровым людям возможна, как и возможен переход в хроническую форму болезни с активацией процесса.
Если же ПЦР положительна в крови, то это уже не носительство и требует специфического лечения. Количественный результат ПЦР оценивается только врачом индивидуально для той или иной инфекции отдельно и не имеет общих градаций. На основании количественного результата ПЦР врач может установить степень активности инфекции и выставить стадию болезни, что безусловно отразится на курсе и дозах назначенных лекарственных средств. Один из последних волнующих вопросов: насколько точна ПЦР-диагностика? Для ПЦР анализа существует 3 определения: 1. Точность с высокой долей вероятности возможно выявление или отсутствие инфекции.
Это исследование крови на антитела, его также называют исследование — anti-HCV. Скрининговое обследование — это диагностическая процедура, которая позволяет с высокой степенью вероятности исключить болезнь среди людей, у которых нет явных симптомов. Иными словами, это лабораторный или инструментальный метод, который позволяет быстро, эффективно и недорого обследовать большое количество людей, которые не имеют жалоб, для того чтобы на ранних стадиях выявить заболевание, и излечить его в более короткие сроки и с лучшими результатами. Подобным примером является флюорографический скрининг взрослых для выявления заболеваний легких в первую очередь, туберкулеза. Однако подобные скрининговые методы, как правило, не являются окончательными в постановке диагноза, и требуют дальнейшего дообследования. В случае с гепатитом С таким уточняющим анализом является определение РНК вируса гепатита С в крови, который позволяет выявить непосредственно сам вирус, вернее, его генетический материал. Как мы уже неоднократно упоминали в нашем блоге, просто наличие антител не является основанием для установления диагноза в случае с большинством инфекций. Дело в том, что антитела образуются как защитная реакция организма на проникновение чужеродного агента, и могут сохраняться очень длительное время даже после выздоровления. Таким образом, человек, у которого при скрининговом обследовании обнаружены антитела к гепатиту С, может и не иметь вируса в крови, а значит и самого заболевания.
Антитела к вирусу гепатита С
Качественный анализ способом ПЦР — высокочувствительный тест, определяющий наличие РНК вируса в крови в минимальной концентрации. Обычно подобная разновидность полимеразной цепной реакции ставится по технологии обратной транскрипции. Проведение исследования возможно только одним способом — методом real-time. В ходе подготовки материала к постановке ПЦР в образец добавляют краситель. После каждого цикла амплификации проводится автоматизированное количественное исследование в режиме реального времени. Нередко методику проводят в сочетании с обратной транскрипцией. Таким образом возможно качественное определение малого количества копий РНК вируса. Анализ сдается проводится на конечной стадии диагностического процесса. Принцип исследования построен на разнице в последовательности нуклеотидов, что отличает один генотип вируса гепатита С от другого. Обычно анализ делают методом мультипраймерной мультиплексной ПЦР. При подозрении на носительство вируса, необходимо выполнить качественную ПЦР.
Если результат отрицательный, человек скорее всего здоров. Но для полного исключения заражения рекомендуют повторить исследование через 7—10 дней. Если же РНК вируса обнаружена, проводят дальнейшие тесты количественный и генотипирование. Показания к проведению лабораторного теста Основным показанием к сдаче крови на гепатит С методом полимеразной цепной реакции является положительный результат иммуноферментного анализа вне зависимости от разновидности: Total, дифференцированный тест на IgG и IgM. Кроме того, провериться нужно: в период беременности тест делают дважды — в первом триместре и за 7—10 недель до родов ; при работе, связанной с повышенным риском инфицирования медсестры, лаборанты, работники донорских центров, косметологи и т. Рост заболеваемости растет с каждым годом. Поэтому для раннего выявления инфекции лабораторные тесты на HCV рекомендуют сдавать один раз в год. Где сдать анализ При обращении в поликлинику, пациент имеет право на бесплатные анализы. Но сначала сдают тест ИФА. И только при положительном либо сомнительном результате показано исследование методом ПЦР.
Поэтому провести срочную диагностику можно обратившись в платную лабораторию, где сдать кровь на ПЦР можно в удобное для пациента время. Одновременно рекомендуют сразу проверить показатели печеночных ферментов, стандартные клинические параметры крови. Как правило, изучение крови методом ПЦР доступно практически в любой лаборатории. Если пункт забора крови не оснащен должным оборудованием, биологический материал транспортируют для проведения исследования с соблюдением температурного режима и других условий. Проведение ПЦР в поликлинике возможно только после других обследований, результаты которых косвенно укажут на наличие гепатита С. Как правильно сдавать кровь Перед тем, как сдавать кровь на обнаружения возможного вируса, следует соблюсти ряд правил подготовки к анализу. Основные аспекты указаны в памятке: За 5—7 дней отказаться от потребления жирной, жареной пищи, алкоголя. За 12—14 часов до проведения исследования не есть. Пить можно только воду. Сдать кровь лучше в первой половине дня.
До процедуры не курить.
Токарев отметил, что иногда люди бывают сверхраспространителями вируса. В таком случае ПЦР-тест всегда даст положительный результат.
Ранее Дмитрий Медведев заявил, что в плане регламентирования коронавирусных ограничений и ответственности за их нарушение российское законодательство остается очень либеральным.
Однако стоит учитывать, что несмотря на всю свою высокую чувствительность и специфичность, методика имеет определенный порог чувствительности. Если концентрация возбудителя на момент обследования не переходит границу этого порога, результат будет расцениваться, как отрицательные. Хотя на самом деле окажется ложным до поры до времени. Доктора акцентируют особое внимание на том, что отрицательный результат не всегда означает отсутствие патологии. Кто из докторов выполняет расшифровку результатов ПЦР Часто среди пациентов звучит вопрос о том, какой врач будет проводить расшифровку ПЦР исследования. В первую очередь необходимо запомнить, что доверять результаты стоит тому же медицинскому работнику, что первоначально давал направление на исследование. Связана эта рекомендация с тем, что в этом случае доктор будет представлять себе, что он ожидает увидеть в анализах. Сможет грамотно интерпретировать итоги, соотнося их с клинической картиной. Получить направление наиболее часто можно от уролога, гинеколога или венеролога.
Соответственно, после получения итогов относить бланк с результатами стоит кому-то из них. Важно помнить, что ПЦР — довольно дорогой метод диагностики. Его не принято использовать просто так, без специальных показаний к обследованию. Среди них: появление специфических для ЗППП симптомов обследование перед планированием беременности или процедурой искусственного оплодотворения поиск причин бесплодия и другие показания Когда показатели ПЦР становятся положительными после заражения Часто пациенты задают на приеме у медицинского работника вопрос о том, когда результаты ПЦР крови и мазков становятся положительными после заражения. Все зависит от того, насколько быстро конкретная инфекция сможет, размножаясь, пройти пороговую для теста концентрацию в материале. Преимуществом ПЦР является то, что порог чувствительности у теста довольно низкий. Это значит, что выявить признаки заражения можно даже в том случае, если количество возбудителя в биологическом материале будет минимальным. Подобная особенность дает возможность постановки диагноза даже в период инкубации, когда симптомы еще полностью отсутствуют. Однако осечка возможна и при применении ПЦР методики. Это происходит, например, если пороговая концентрация все же не успела достичь определяемых тестом значений.
В этом случае велика вероятность получения далеких от правды результатов. Как отмечают доктора, ничего сложного во внешнем виде бумаги нет. Зачастую на документе можно обнаружить название искомого возбудителя. А напротив него пометку «обнаружен» или «не обнаружен». В первом случае пациенту рекомендуется озаботиться собственным здоровьем. Так как анализ расценивается как положительный, а человек, как зараженный. Следовательно, ему требуется терапия.
Врачи ищут в крови антитела IgM и IgG. Первые показывают, есть ли болезнь в данный момент. А вторые указывают на то, что человек уже переболел и у него формируется иммунитет. IgM меньше 1 и IgG меньше 10 Это говорит о том, что пациент еще не сталкивался с заболеванием. А это значит, что человек находится в зоне риска и может заразиться в любой момент. Если пришли такие результаты, значит, нужно носить маску и перчатки в общественных местах. А также пользоваться антисептиками и избегать мест большого скопления людей. IgM от 1 до 2 и IgG меньше 10 Такие цифры говорят о том, что есть вероятность заражения коронавирусом. Скорее всего, человек даже не чувствует симптомов.
Почему "ошибаются" ПЦР-тесты - эксперт
ПЦР-тест необходимо сдавать для установления факта заболевания коронавирусом. Этот вариант диагностики позволяет обнаружить вирус на его начальной стадии, даже если у пациента еще нет признаков и симптомов болезни. Антитела, в свою очередь, это ответная реакция организма на коронавирус. Результат теста на антитела IgG и IgM позволяет понять, на какой именно фазе заболевания находится пациент, а также помогает определить, была ли перенесена инфекция в прошлом. Если Вы хотите максимально точно определить болеете ли Вы, на какой стадии заболевания находитесь или же понять, было ли заболевание в прошлом, то лучшим вариантом будет сдача не только ПЦР-теста, но и теста на антитела. В совокупности, результаты этих тестов дадут самый четкий и информативный результат. Для того, чтобы понять, что означают те или иные результаты, необходимо рассмотреть каждый случай по отдельности: ПЦР — отрицательный, IgG — положительный, IgM — отрицательный.
Анализ высоко чувствителен и специфичен и считается «золотым стандартом» диагностики заражения и финального контроля эффективности терапии.
Так, результат лечения альфа-интерфероном оценивают через 24 недели по окончании курса по наличию или отсутствию РНК HCV в крови. В результатах исследования указывается, есть ли вирус в организме или нет при отсутствии инфицирования или при выздоровлении. Пройдите онлайн-тест, чтобы узнать есть ли у вас аллергия Количественный анализ: когда он нужен? Количественный анализ — способ определения вирусной нагрузки на организм.
ПЦР диагностику используют повсеместно. Все ведущие клиники используют диагностику ПЦР для верификации инфекционных заболеваний. Часто пациенты спрашивают, какие именно заболевания можно выявить при помощи метода ПЦР диагностики? Диагностика методом ПЦР используется для выявления широкого спектра возбудителей. Как делают ПЦР анализ?
Такое исследование проводится одинаково для диагностики любого заболевания. Разница может быть лишь в исследуемом субстрате. Для этого пробирку с биоматериалом помещают в реактор, где с помощью катализаторов происходит процесс копирования молекул ДНК возбудителя инфекции. Метод ПЦР очень быстрый и простой. В качестве результата, вы получаете заключение врача лаборанта. В результате четко будет прописано: получен положительный результат или отрицательный. Ответ приходит на конкретную инфекцию.
Показания к исследованию Определение ВПЧ в гинекологических мазках проводится: Если имеются опухолевидные разрастания в области половых органов и необходимо уточнение причины их появления. Для выявления скрыто протекающей инфекции. С целью контроля за эффективностью лечения. В случае выявления отклонений при исследовании цитологии мазков из цервикального канала и влагалища. Исследование делают всем женщинам в возрасте от 21 года до 69 лет. Скрининг проводится при обращении к гинекологам после начала половой жизни и в более раннем возрасте. Что означают результаты Расшифровка анализа на вирус папилломы человека ВПЧ в гинекологии осуществляется врачами лаборатории. Заключение выдается на специальном бланке. Первой строчкой анализа оценивается контроль взятия мазка КВМ у женщин, важно, чтобы он не был ниже установленной нормы. Если КВМ менее 4, то есть вероятность ошибки при исследовании. Что такое в анализе контроль взятия мазка КВМ? Это объем исследуемого материала, не позволяющий пропустить во время проведения реакции вирусные частицы. В норме по анализам у женщин вирус папилломы человека ВПЧ не обнаружен. Такая запись должна быть во всех строчках, в которых перечислены генотипы вирусов. При положительной реакции ПЦР на определенные генотипы напротив соответствующего вируса указано «обнаружен».
ПЦР анализ: что это такое? На какие 12 инфекций сдается?
это определение вируса в мазке из ротоглотки методом ПЦР. Подробное описание: что такое ПЦР-тест на ковид, что показывает и как узнать результат. Как проводится забор биоматериала, как подготовиться. Подробное описание: что такое ПЦР-тест на ковид, что показывает и как узнать результат. Как проводится забор биоматериала, как подготовиться. Что представляет собой анализ методом ПЦР? ПЦР-тест (Мазок) на Коронавирус. Предназначение у него одно: определить есть ли вирус COVID-19 в организме в данный момент (Real-Time PCR). Тесты на ВПЧ могут быть качественными (простой ПЦР) и количественными (Digene test, ПЦР), они предназначены для выявления некоторых типов папилломавирусов.