Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе). Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это метод молекулярно-генетической диагностики, позволяющий обнаружить в организме человека различные инфекционные заболевания. Основан на использовании ПЦР (полимеразная цепная реакция – методика, позволяющая увеличить малую концентрацию некоторых фрагментов ДНК в биологическом материале) в режиме реального времени. С помощью полимеразой цепной реакции (ПЦР) мочи проводится детализированный анализ.
ДНК - диагностика инфекций
Но зато, если обнаруживают живую трихомонаду - этого достаточно, чтобы поставить диагноз. Безусловно, кроме живых препаратов также изучают и фиксированные. Проблема ложноположительных результатов наиболее часто применяемого в России микроскопического исследования на трихомонады с использованием окрашенных препаратов не менее актуальна, поскольку существуют объективные причины для гипердиагностики данного представителя простейших. Влагалищные трихомонады могут быть весьма вариабельны по размеру и форме, что нередко побуждает исследователя искать так называемые «атипичные формы», за которые могут быть приняты клеточные элементы, которые в процессе приготовления мазка в ряде случаев приобретают необычные морфологические характеристики. Любая же атипия является не дополнительным резервом эффективной диагностики, а реальным источником диагностических ошибок. К существенным недостаткам этого метода можно отнести - длительность проведения анализа 3-17 суток и дороговизна.
Кроме того есть ограничения по жизнеспособности самих исследуемых патогенов. Наиболее достоверные результаты обследования на трихомонаду могут быть получены при сочетании как минимум двух методов: микроскопия мазка - культуральный метод или микроскопия мазка - ПЦР. Иммунофлуоресцентный анализ также используется для диагностики трихомониаза, однако отрицательный результат при использовании этого метода не является абсолютным, необходимо проводить дополнительные исследования. При бессимптомном течении трихомониаза часто применяется ПЦР - диагностика. Исследование гуморального ответа при трихомониазе, как и при гонорее, в диагностических целях не регламентировано.
Что касается диагностики хламидиоза, то здесь, по-прежнему, «золотым стандартом» считается культуральный метод. По мнению ведущих российских специалистов Института Пастера Санкт-Петербург , занимающихся изучением проблем диагностики хламидиоза, для выявления этой ИППП необходимо применение сразу трех методов: прямая иммунофлуоресценция исследование препарата под микроскопом с использованием специфических антител к антигенам , культуральный метод и ПЦР. Используется и еще один метод диагностики - иммуноферментный анализ на наличие в крови специфических антител. При этом, в отличие от всех других ИППП, только для хламидий имеет смысл проводить иммуноферментный анализ на наличие в крови специфических антител, поскольку во всех остальных случаях генерализованный иммунный ответ на инфекцию возникает чрезвычайно редко, следовательно, невозможно определить антитела к конкретному патогену, ведь они просто не образуются. При хламидиозе вероятность появления антител выше, поскольку ярче выражен иммунный ответ организма на появление этого патогена, но, тем не менее, и здесь далеко не во всех случаях у инфицированного пациента наблюдается присутствие антител в крови.
К примеру, когда проводились исследований в парах, оказалось, что даже если методом ПЦР хламидии были обнаружены и у мужчины и у женщины, в большинстве случаев антитела в крови присутствовали у женщины, а у мужчины - нет. Это связано с тем, что у мужчин данная инфекция гораздо реже вызывает генерализованный ответ. Как и для диагностики трихомониаза, для выявления хламидии необходимо, как минимум, сочетание двух методов.
Обследование обладает высокой диагностической ценностью для исключения инфекционной патологии у беременных. Оно проводится в качестве скрининга при первом обращении к гинекологу, потом при необходимости назначаются повторные исследования. Правила сдачи ничем не отличаются от установленных для всех, сдавать мазок на ПЦР можно даже на поздних сроках вынашивания ребёнка.
Как сдавать и через сколько готов результат Как сдавать и через сколько готов результат Большинство посетителей клиники испытывает лёгкий страх перед тем, как сдавать анализы. Процедура является полностью безопасной и безболезненной, количество осложнений при её проведении стремится к нулю. Забор для лабораторной диагностики проводится по предварительной записи, ведь к визиту врача необходимо подготовиться. Легче всего подготовиться к анализу крови, никаких ограничений здесь нет. Сдача крови осуществляется натощак, забор материала происходит из вены в объеме до 10 мл. Мазок методом ПЦР делают со слизистых шейки матки из цервикального канала , уретры и влагалища.
Каждое предметное стекло маркируется в зависимости от отдела, откуда брали материал, латинскими буквами C, V, U и направляется в лабораторию. Сколько будет готовиться результат во многом зависит от лаборатории и её загруженности. В среднем, срок составляет двое суток.
Хламидийная и микоплазменная инфекции с помощью мазка не определяются4. Иммунофлюоресцентное исследование Иммунофлюоресцентный анализ — определение структурных антигенов с помощью меченных красителем-флюорохромом антител1. Позволяет выявить как антигены самого возбудителя, так и наличие антител к нему в патологическом материале или сыворотке крови. Краситель обладает флюоресцентным свечением, видимым под микроскопом5. Культуральное исследование По-другому называется бакпосев или бактериологическое исследование.
Исследуемый материал сеют на питательные среды, культивируют и оценивают выросшие колонии возбудителя. Бакпосев позволяет обнаруживать все живые культивируемые микроорганизмы и определять антибиотикоустойчивость микробов. Это удобно, так как врач сразу получает информацию о возбудителе инфекции и об эффективных антибиотиках против него. Из недостатков метода — жесткие требования к взятию и хранению материала, а также длительные сроки культивирования от 5 дней 3. Сейчас появились тест-системы с быстрым получением результата в течение 48 часов и одновременным определением сразу нескольких возбудителей6. Иммуноферментный анализ Метод применяется для определения и антигенов возбудителя, и антител человека. Антигены и антитела соединяются вместе, именно этот комплекс метод и обнаруживает через окрашенную метку. Интенсивность окрашивания зависит от количества выявленных специфических комплексов.
Иммуноферментный анализ с определением циркулирующих антител эффективно используется при скрининге на сифилис, вирусный гепатит С и ВИЧ-инфекцию. Иммуноферментный анализ с определением антигенов возбудителей проводится для диагностики вирусного гепатита B. В настоящее время доступны быстрые экспресс тесты для предварительной диагностики ВИЧ-инфекции, гонореи, хламидийной инфекции и сифилиса.
Женщинам отказаться от вагинальных контрацептивов, спринцевания, лечебных вагинальных суппозиториев, лубрикантов. Остаточные фрагменты препаратов повлияют на точность диагностики. Устранить из рациона продукты, обладающие свойством окрашивать урину свекла, спаржа, морковь, ревень, ежевика.
Исключить употребление алкогольных напитков. Соблюдать стандартный питьевой режим. Увеличивать или уменьшать объем выпиваемой жидкости не нужно. Проводить гигиену гениталий без использования парфюмированных средств мыла, геля. Воздержаться от интимной близости. Приобрести в аптеке герметичный стерильный контейнер для сбора урины.
Женщины не сдают мочу на анализ в первую неделю фолликулярной фазы менструального цикла период кровяных выделений. Для экстренного исследования рекомендуется собрать урину катетером или использовать плотный гигиенический тампон. Сбор и хранение мочи для анализа Непосредственно перед сбором мочи гигиену наружных половых органов не проводят чтобы инфекционные агенты, локализованные на гениталиях, попали в урину. На исследование отправляется первая или средняя порция утренней мочи, собранной натощак.
Какие анализы сдать на половые инфекции
| ПЦР анализ как метод выявления инфекций | Проведение анализа ПЦР на половые инфекции в Бест Клиник гарантирует максимально быстрый и достоверный результат. |
| Мазок ПЦР у женщин: как готовиться, как берут ПЦР у женщин. | ПЦР (полимеразная цепная реакция). |
| ПЦР на инфекции | ПЦР (полимеразная цепная реакция). |
Мазок ПЦР на половые инфекции у женщин
Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов. Специальные комплексы:.
Перед анализом на венерические инфекции необходимо воздержаться от половой активности в течение суток. Перед анализом нельзя использовать никакие противовирусные препараты. Подробную инструкцию по правилам подготовки к каждому анализу вы всегда можете получить у лечащего врача или у консультантов на нашей горячей линии. Как проводится ПЦР-анализ С 1983 года, когда был изобретен данный метод, прошло много времени, и технологии не стоят на месте.
Сегодня существует несколько различных методик для проведения ПЦР-теста: С обратной транскрипцией. Самый распространенный способ идентификации известной последовательности РНК, включающий амплификацию, определение патогена и его идентификации среди образцов, хранящихся в научной картотеке. Вложенная ПЦР или «гнездовая» — используется для снижения количества неспецифичных продуктов реакции и имеет две стадии с использованием двух видов праймеров. Изотермические методы — не требуют повторяющихся температурных циклов, менее энергозатратны. Инвертированная ПЦР — применяется, если имеется только короткий фрагмент известной последовательности, но необходимо определить соседние последовательности после вставки ДНК в геном. ПЦР в реальном времени — метод, позволяющий определить не только присутствие целевой нуклеотидной последовательности в образце, но и измерять количество ее копий после каждого цикла амплификации, что дает возможность для проведения тестов с количественным результатом Это далеко не все существующие на сегодняшний день разновидности ПЦР-технологий. Ученые активно развивают эту важную и перспективную область лабораторной диагностики, совершенствуют методы ПЦР, оттачивают техники и изобретают новые подходы.
Иногда возможно проведение экстренного теста — его часто используют при оказании срочной медицинской помощи при госпитализации. Тогда срок готовности результата сокращается до считанных часов. Результаты ПЦР-теста дадут точную информацию о том, какая инфекция была обнаружена. При количественном тестировании анализ определит также вирусную или бактериальную нагрузку на организм. В этом случае в результатах будет значиться титр обнаруженного патогена его количество в одном миллилитре пробы. Количественный анализ особенно важен при диагностике заболеваний, спровоцированных условно-патогенными микроорганизмами, которые присутствуют в норме практически у каждого человека.
Во время профилактического осмотра врач оценит состояние половых органов и при необходимости назначит уточняющие анализы. Обычно в ходе профилактических осмотров гинеколог не берет материал для анализов на ИППП. Поэтому, если девушка подозревает, что заразилась, стоит без стеснения рассказать об этом доктору.
Рекомендации по анализам на ИППП зависят от возраста и сексуальной активности. Самая общая такая: женщинам от 15 до 65 лет — провериться на ВИЧ хотя бы один раз в жизни. У некоторых ИППП нет явных симптомов. Единственный способ узнать наверняка — сдать анализы на скрытые инфекции. Регулярно делать такие тесты нужно женщинам любого возраста из группы риска. В нее входят те, кто: уже болели ИППП в прошлом; занимаются сексом без презерватива с новыми партнерами; состоят в открытых отношениях: когда постоянный партнер занимается сексом с другими; занимаются групповым сексом; употребляют наркотики внутривенно или через нос — заразиться можно только через предметы общего пользования; работают в сфере секс-услуг. После незащищенного секса с малознакомым человеком Незащищенный секс может принести много хлопот — от ИППП до внезапной беременности. В панике хочется пробовать разные народные методы и советы друзей. Вот чего делать не стоит: промывать влагалище растворами антисептиков, хлоргексидином или мирамистином для «экстренной профилактики».
Это негативно влияет на микрофлору влагалища, к тому же есть риск, что инфекция попадет в другие органы малого таза; пить без назначения врача антибактериальные, противопаразитарные и противовирусные препараты или использовать их в виде свечей. Можно ошибиться с выбором лекарства и его дозой.
Минусы диагностики с помощью ПЦР анализа: Результат анализа во многом зависит от того, как проводилось исследование и в каком помещении. Из-за высокой чувствительности в материал могут проникнуть чужеродные микроорганизмы из внешней среды, поэтому в лабораториях обязательны биологические фильтры воздуха с высокой степенью фильтрации. Брать анализ и оценивать результаты должен исключительно лечащий врач. Это важно потому что не всегда положительный результат является заболеванием. Возможно, пациент уже прошел курс лечения, а инфекция и возбудители удаляются из организма не сразу.
И, конечно, от правильности взятия анализа зависит точность ответа. Проводить анализ обязан только врач, который имеет квалификацию и четкие инструкции от лаборатории по взятию материала для пцр анализа. Когда врач назначает ПЦР анализ Данное исследование назначает специалист в случае жалоб пациента на необычные и симптомы: Зуд и жжение в области половых органов Обильные выделения с неприятным запахом, изменившейся консистенцией и цветом. Боли внизу живота, а также при мочеиспускании Также Вы можете попросить врача провести обследование, если имел место незащищенный половой контакт с неизвестным партнером.
Мазок ПЦР: в каких случаях дают направление женщинам и мужчинам
Анализ ПЦР на инфекции у женщин дает возможность определить следующие заболевания: трихомониаз; вирус папилломы человека различных типов некоторые из них могут спровоцировать онкологические заболевания ; уреаплазмоз; микоплазмоз. Кроме того, при подозрении на некоторые заболевания может быть назначен анализ крови методом ПЦР, например, при наличии симптомов инфекционного мононуклеоза, вирусного гепатита, ВИЧ. Особенности подготовки и проведения анализа ПЦР на инфекции у женщин Мазок рекомендуется брать примерно на 6-й день менструального цикла, то есть сразу после окончания менструального кровотечения. Если мазок берется из мочеиспускательного канала, за два часа до процедуры не следует мочиться. При заборе материала из влагалища за сутки следует исключить спринцевания и половую близость. Другой подготовки к исследованию не требуется, поэтому оно отличается простотой и удобством для пациентки.
За 10 дней до сдачи мазка врач может попросить прекратить курс лечения. У мужчины забор мазка из уретры может быть довольно болезненным.
Некоторое время после этого возможно чувство жжения и дискомфорт при мочеиспускании. ИППП, которые можно выявить с помощью ПЦР Расшифровка результатов анализа — возможные заболевания С помощью ПЦР-анализа можно выявить самые различные инфекции, передающиеся при незащищенном половом акте, в том числе и те, что не имеют симптомов и протекают в скрытой форме. Распространенные заболевания: Хламидиоз. Хламидии могут поражать уретру, глаза, кишечник , влагалище , шейку матки. Если хламидиоз обнаруживается в период вынашивания ребенка, его необходимо вылечить до родов, чтобы ребенок не заразился в процессе родовой деятельности. К симптомам хламидиоза относятся у мужчин дискомфорт при мочеиспускании и выделения, у женщин обильные выделения, боли в нижней части живота, прорывные кровотечения. Бактерии уреаплазмы способны вызывать заболевания половой сферы, но иногда они встречаются и у здоровых людей.
Обычно никаких симптомов не наблюдается, но уреаплазма в редких случаях может вызывать воспалительный процесс, уретрит у мужчин, выкидыши у женщин. Микоплазма имеет множество видов, но опасными являются единицы. Микоплазма приводит к самым разным заболеваниям. Наиболее распространенные симптомы: выделения, жжение при мочеиспускании, боли в паху, которые у женщин могут усиливаться во время сексуального акта, а также различные осложнения во время беременности. Мужчины редко болеют микоплазмозом, чаще они являются его носителями. Кандидоз молочница. Симптомы молочницы знакомы многим женщинам: боль, зуд, творожистые обильные выделения.
Грибок под названием Кандида присутствует в микрофлоре влагалища постоянно, но когда грибок начинает активно размножаться, начинаются воспалительные процессы. У мужчин молочница не имеет явно выраженных симптомов, но может быть зуд и сыпь. Инкубационный период может длиться до месяца, а затем начинают появляться симптомы: покраснение и отек гениталий, обильные выделения, мелкие язвочки на половых органах, выделения с резким неприятным рыбным запахом. У мужчин симптомы могут не проявляться вовсе, но может быть жжение при мочеиспускании. Вирус папилломы человека известен давно. На поверхности половых губ и влагалища появляются небольшие образования — папилломы. Однако они появляются не всегда.
ВПЧ опасен тем, что вызывает рак шейки матки. Курс лечения довольно длительный. ВПЧ лечится, но полностью из организма не исчезает.
После присоединяют стерильную пробирку с пробкой к другому концу иглы. Под действием градиента давления вакутейнер создает вакуум между иглой и пробиркой кровь легко поступает в пробирку. Это исследование требуется для решения о назначении противовирусной терапии и прогноза степени риска передачи вируса от беременной к плоду. Какой материал брать на исследование, решает врач исходя из клинической ситуации.
Какие именно возбудители будут разыскиваться при помощи ПЦР — определяет врач- венеролог после осмотра. Хранение и транспортировка ПЦР анализов Стерильные емкости и предметные стекла категорически нельзя замораживать. Хранить в помещении не более двух часов, и только в крайних случаях — в холодильнике еще 20 часов. Необходимость обеспечивать температурный режим транспортировке в специальную генетическую лабораторию обуславливает использование термоконтейнеров. В них поддерживается температура от 4 до 8 градусов Цельсия. Поэтому очевидным плюсом медицинской организации является собственная лаборатория, способная выполнить полимеразную цепную реакцию. Далее материал помещается в термостат в микроцентрифужных пробирках с добавлением амплификационной смеси на несколько часов.
Для сравнения выполняется контроль с известными ДНК определенных микроорганизмов. Выполняется электрофорез со смесью бромистого этидия и ДНК, что вызывает свечение в ультрафиолетовых лучах. Электрофорез позволяет разделить продукты амплификации. При положительном результате теста они дают оранжевое свечение в коротком участке светового спектра.
При заборе материала из влагалища за сутки следует исключить спринцевания и половую близость. Другой подготовки к исследованию не требуется, поэтому оно отличается простотой и удобством для пациентки. Забор биологического материала осуществляется стерильным инструментом, процедура занимает несколько секунд. После этого в лаборатории материал помещается в специальное оборудование, к нему добавляют фермент для создания копии генетического материала. Специалисты сравнивают результат с эталонными образцами, после чего расшифровывают показатели.
Записаться на исследование по методике ПЦР для выявления венерических инфекций можно в нашей клинике.
Блок урогенитальных инфекций методом ПЦР (определение в материале методом ПЦР )
Однако чувствительность данного метода ограничена около 105 бактерий в 1 мл. Практически не определяются в урогенитальном мазке вирусы, хламидии, микоплазмы и уреаплазмы, и одних только результатов мазка часто бывает недостаточно для постановки диагноза. Результаты мазка обычно можно использовать как ориентировочные. Перед сдачей мазка лучше воздержаться от мочеиспускания. Бактериологический метод бакпосев Бакпосев — метод диагностики ЗППП путем выращивания микробов в благоприятной для этого среде.
Он является золотым стандартом в определении инфекций, поскольку выявляет не только вирус, но и его активность. Преимуществом данного метода является возможность не только выявить бактерию, но и возможность получить антибиотикограмму, на основе которой врач назначает точное лечение. Наиболее часто бакпосев используют для диагностики уреаплазмоза, микопламзоза, трихомониаза, хламидиоза, различных форм кандидоза.
Сколько это стоит? Как долго придется ждать результата? Чтобы эффективно лечить инфекцию, нужно знать в лицо возбудителя. Но обнаружить «виноватого» вируса или микроба иногда бывает очень непросто: не все микроорганизмы получается выращивать в лаборатории на специальных питательных средах; некоторые возбудители находятся в скрыто существующих формах, при этом инфекция имеет латентное или хроническое течение; существуют микробы, которые паразитируют внутри клеток человека и за счет этого успешно скрываются; некоторые возбудители обладают высокой антигенной изменчивостью.
Все эти сложности помогает преодолеть особый метод диагностики: полимеразная цепная реакция, или, сокращенно, ПЦР по-английски — PCR. Придумал её в 1983 году американский ученый Кэри Мюллис. Открытие совершило настолько сильный переворот в медицине, что в 1993 году Мюллис получил за него Нобелевскую премию. Почему полимеразная реакция — цепная? Она позволяет взять одну или несколько молекул дезоксирибонуклеиновой кислоты и быстро размножить их. В результате получают достаточно большое количество генетического материала, доступного для исследования. Реакцию проводят в специальном аппарате — амплификаторе.
Сначала исследуемый образец нагревают, чтобы ДНК которая в норме представляет собой двухцепочечную спираль денатурировала и распалась на две отдельные цепочки. Затем особый фермент полимераза достраивает на каждой из двух цепочек вторую, получается две молекулы ДНК.
За 2 часа до сдачи анализов нельзя мочиться. Мазок у мужчин Мазок из мочеиспускательного канала сдают после несложной подготовки: за 2 суток воздерживаются от половых контактов; за неделю прекращают приём лекарств; гигиену половых органов проводят не утром перед анализом, а накануне вечером; за 2-3 часа до сдачи мазка нельзя мочиться. Образцы хранят при комнатной температуре не больше 2 часов. Транспортируют образцы в специальных термосах или термоконтейнерах. Забор крови: отказ от алкоголя за сутки, от курения за 1 час; временный отказ от лекарств, если позволяет здоровье; перед сдачей крови 20 минут отдыха; накануне исключаются эмоциональные и физические перегрузки. Исследуемый образец, который содержит разбавленную концентрацию матричной ДНК, смешивают с ДНК-полимеразой, находящейся в термостабильном состоянии.
Полимеразная цепная реакция ПЦР диагностика: что это такое В современном мире существует множество способов обнаружить возбудителей заболеваний на разных этапах развития заболевания. Одним из таких методов является PCR метод ПЦР или полимеразная цепная реакция , позволяющий выявить инфекцию на самом раннем этапе. Буквально одна единица ДНК или РНК уже могут указать на наличие того или иного возбудителя в организме при должном уровне подготовки пациента и профессионализма лаборантов медицинского учреждения. ПРЦ-исследование, что это такое? Так как основным хранилищем генетической информации является ДНК дезоксирибонуклеиновая кислота , образованная 2 нитями, соединенными нуклеотидами, именно при множественном копировании синтезе этой кислоты можно установить наличие патогенного организма, если речь идет о бактерии. Бактерии имеют свою собственную оболочку, защищающую их от внешней среды, которая нередко является агрессивной по отношению к последним. У вирусов же нет собственной оболочки у некоторых представителей имеется нечто похожее на оболочку , а информацию в себе несет не ДНК, а РНК рибонуклеиновые кислоты. РНК устроены таким образом, что они встраиваются в цепи ДНК организма-переносчика и меняют их, позволяя проникать в клетки и жить за счет организма. Эти «отпечатки», как и отпечатки пальцев, являются уникальными для каждого возбудителя. Поэтому ПЦР позволяет выявить заболевание на любых этапах, даже если развитие патогена происходит бессимптомно. До широкого внедрения ПЦР в гинекологии и урологии на ИППП широко использовались методы: микроскопия — окрашенные и неокрашенные препараты исследуются через микроскоп. Метод очень завязан на опытности лаборанта. Таким методом хорошо выявляются бактерии, имеющие большой размер гарднереллы, кандиды,трихомонады,гонококки ; бактериология — метод заключается в выращивании возбудителей инфекции на питательном агаре, идентификации возбудителя и определения чувствительности его к антибиотикам. Долгое время считался «золотым стандартом». К минусам относят необходимость быстрой доставке материала в КДЛ клинико-диагностическая лаборатория , сроки выращивания и выяснения чувствительности к группам антибактериальных препаратов как правило, 5-7 суток ; иммуноферментный анализ — Определение антител организма, возникающих в ответ на внедрение антигена возбудителем инфекции. Из плюсов стоит отметить возможность определения стадии заболевания острая стадия сопровождается наличием IgG в сыворотке крови, хроническая — IgM. К минусам относится невозможность определения у людей с ослабленным иммунитетом, а также специфичность ИФА. Другими словами, при наличии только результата иммуноферментного анализа, невозможно было выставить диагноз, а можно было только определить, что организм борется с какой-либо инфекцией. Как происходит сдача анализов на ПЦР В зависимости от материала, который забирается для проведения анализа ПЦР, существует несколько обязательных правил для пациента. Кровь сдается строго натощак утром. Мочу тоже стоит сдавать утром, первую порцию. Мокрота также сдается натощак, хотя это и необязательно. Мазки сдаются в любое время суток и имеют специфические требования. Мазок из ротоглотки также следует сдавать утром до приема пищи. Забор материала производится сертифицированным специалистом стерильными одноразовыми инструментами. Берут анализ крови на ПЦР одноразовым стерильным шприцом, из вены забирают приблизительно 1-2 мл венозной крови для выявления таких инфекций как герпес или ВПЧ вирус папилломы человека.
Микробиологические исследования
Такие праймеры присоединяются к ДНК возбудителя в пробе и под действием катализаторов многократно воспроизводят свои дубли. Этот процесс называются «репликация» — многократное увеличение, дублирование искомого участка до тех пор, пока он не станет доступен для определения. Процесс репликации возможен только при наличии в пробе ДНК возбудителя. Преимущества метода ПЦР Высокая специфичность. Метод ПЦР определяет заданную последовательность нуклеотидов, присущую конкретному патогену. Исключен риск ложноположительных результатов. Для ПЦР достаточно всего несколько молекул ДНК патогена или даже уже неактивных — разрушенных вирусных частиц, сохранивших специфические участки ДНК в достаточном количестве , чтобы он был обнаружен в ходе исследования. Скорость проведения. Лаборатория получает результат ПЦР-теста через несколько часов, клиент — уже на следующий день. Скорость диагностики имеет принципиально важное значение для своевременного лечения.
Например, при диагностике бактериальных инфекций классический посев занимает от нескольких дней, а с ПЦР-анализом пациент сможет принять меры и начать лечение уже через сутки. Для исследования подходит любой биоматериал: кровь, моча, сперма, мокрота, гной, жидкости из абсцессов и пр. Кроме этого, ПЦР применяется в самых разных областях науки и медицины, работая даже там, где другие методы бессильны. Диагностика латентных инфекций. ПЦР-диагностика определяет возбудителя инфекции даже в инкубационном периоде и при скрытом течении заболевания. Какие есть недостатки Единственный серьезный недостаток, связанный с методом полимеразной цепной реакции, - его высокая технологичность. Исследования ПЦР требуют строжайших соблюдений правил и серьезной оснащенности лабораторного комплекса.
Мазок методом ПЦР делают со слизистых шейки матки из цервикального канала , уретры и влагалища. Каждое предметное стекло маркируется в зависимости от отдела, откуда брали материал, латинскими буквами C, V, U и направляется в лабораторию.
Сколько будет готовиться результат во многом зависит от лаборатории и её загруженности. В среднем, срок составляет двое суток. В экстренных случаях время выполнения может сократиться до нескольких часов. Правила расшифровки результатов Правила расшифровки результатов Неоспоримым преимуществом метода ПЦР является его доступность, сверхточный анализ мазка и исключение ложноположительных и ложноотрицательных тестов. Все возбудители половых инфекций идентифицируются данным исследованием, вероятность ошибки составляет менее 0. ПЦР-анализ позволяет определить минимальные содержания вируса в организме. Сам аппарат распознает единичные фрагменты ДНК или РНК и многократно их копирует в пробирке, затем анализирует и выдает результат на бумагу. Если процесс копирования репликации генома вируса прошёл успешно, то результат будет положительным. Отрицательный же тест подтверждает отсутствие генетических структур в организме, а следовательно, и отсутствие заболеваний.
Понравилась статья?
ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 - 15 мин. Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку.
Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой - позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации загрязнения материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР. Словарь ДНК — дезоксирибонуклеиновая кислота - биологический полимер, один из двух типов нуклеиновых кислот, обеспечивающих хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов. В природе РНК, как правило, существует в виде одиночной цепочки. У некоторых вирусов РНК является носителем генетической информации. В клетке играет важную роль при передаче информации от ДНК к белку. Процесс этот называется транскрипцией. Все три вида РНК тем или иным способом участвуют в синтезе белка. Однако информация по синтезу белка содержится только в мРНК.
Гигиеническая процедура только тёплой водой проводится накануне вечером, не утром. За 2 часа до сдачи анализов нельзя мочиться. Мазок у мужчин Мазок из мочеиспускательного канала сдают после несложной подготовки: за 2 суток воздерживаются от половых контактов; за неделю прекращают приём лекарств; гигиену половых органов проводят не утром перед анализом, а накануне вечером; за 2-3 часа до сдачи мазка нельзя мочиться. Образцы хранят при комнатной температуре не больше 2 часов. Транспортируют образцы в специальных термосах или термоконтейнерах. Забор крови: отказ от алкоголя за сутки, от курения за 1 час; временный отказ от лекарств, если позволяет здоровье; перед сдачей крови 20 минут отдыха; накануне исключаются эмоциональные и физические перегрузки.
На какие ИППП провериться женщине
У женщин анализ крови на ВИЧ с ПЦР, а также поиск других возбудителей с помощью этой методики очень информативен, дает вероятность точного результата в 90-95% случаев. Анализ на инфекции, передающиеся половым путем — простой, быстрый и достоверный способ обнаружения возбудителей этих заболеваний. Анализы. Комплексы анализов. Инфекции, передаваемые половым путём (ИППП). Главная Акции Комплексное исследование ЗППП, NCMT, ПЦР-анализ мазка, кач. Сдала анализ на самые распространённые иппп методом пцр.
Анализы на ЗППП — виды, особенности проведения, правила подготовки
Инфекции, которые передаются половым путем (ИППП), представляют собой целую группу заболеваний. Для выявления инфекций, передающихся половым путём, как правило, используется несколько методов лабораторной диагностики: микроскопия, ПИФ, ПЦР. для выявления данных инфекций рекомендуется использовать метод иммуноферментного анализа. ПЦР или полимеразная цепная реакция является золотым стандартом в диагностике многих инфекций.
Анализ ПЦР: расшифровка, как берут у мужчин и женщин
| Анализы на скрытые инфекции у женщин | ПЦР-тест направлен на определение возбудителя заболевания, а не на реакцию на его проникновение со стороны организма. |
| Блок урогенитальных инфекций методом ПЦР (определение в материале методом ПЦР ) | Анализы на ЗППП (заболевания, передающиеся половым путем): что это, когда показаны, виды исследований, порядок их проведения, правила подготовки. |
| Диагностика урогенитальных инфекций. Анализы на мочеполовую инфекцию и пр. | Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того, как. |
| ПЦР диагностика скрытых инфекций | Цена на анализ ПЦР-10 "Исследование урогенитальных инфекций при планировании беременности". |
| ПЦР мочи: сдать анализы ПЦР на ЗППП и ИППП в Москве – Поликлиника +1 | Основан на использовании ПЦР (полимеразная цепная реакция – методика, позволяющая увеличить малую концентрацию некоторых фрагментов ДНК в биологическом материале) в режиме реального времени. |
Диагностика урогенитальных инфекций
Мазок ПЦР у женщин и мужчин выявляет. Анализы на инфекции. Анализ на скрытые инфекции у женщин проводится двумя способами: изучением биоматериалов, взятых из вены и влагалища. Анализы на ЗППП (заболевания, передающиеся половым путем): что это, когда показаны, виды исследований, порядок их проведения, правила подготовки. Для ПЦР-обследования на некоторые виды инфекции более информативным является анализ крови на ВИЧ, на герпес 1 и 2 типа, гепатиты В и С, в том числе с концентрацией.